1.Thin sluoksnio identifikavimo metodas
Įpilkite 0,5 g epimediumo vaistinių žolių miltelių arba atitinkamo ekstrakto kiekio, įpilkite 10 ml etanolio, pasinerkite 30 minučių, filtruokite ir išgarinkite filtratą. Į tirpalą ištirpinkite 1 ml etanolio. Icariino etaloninė medžiaga buvo pasveriama, ištirpinta metanolyje ir praskiedžiama iki 0,1 mg / ml, kuris buvo pamatinis tirpalas. Po 10 μl kiekvieno tiriamojo tirpalo ir etaloninio tirpalo pipete įpilkite tos pačios natrio karboksimetilceliuliozės silicio gelio H plonosios sluoksninės plokštelės kaip rišiklio su etilacetato-butanono-skruzdžių rūgšties-vandens (10: 1: 1 : 1) kaip besivystantis agentas, ištrauktas, išdžiovinamas oru ir padėtas į UV lempą (365 nm). Bandinio chromatogramoje tokia pat tamsiai raudona vieta rodoma etaloninės medžiagos chromatogramoje; purškiamas trichlorinimu. Aliuminio bandymo tirpalas buvo vėl panaudotas UV spinduliuote (365 nm), kad būtų atskleista ta pati oranžinės raudonos fluorescencinės dėmės vieta.
2. Spektrofotometrinis bendras epitelio ir jo ekstraktų flavonoidų nustatymas
Pamatinis vaistas icariinas tiksliai pasvertas ir suformuluotas į standartinį 10 μg / ml tirpalą su metanoliu. Tiksliai pasverkite šio produkto miltelių kiekį (atitinka maždaug 1 mg icariino), sonikatuokite 30 minučių metanoliu 25 ml, praskieskite 50 ml matavimo kolbą, filtruokite 0,45 μm mikropuru membrana, ty tirpalą ištirti. Bandymo tirpalas ir etaloninis tirpalas buvo paimami atskirai, o absorbcija matuojama 270 nm bangos ilgiu su reagentu kaip tuščia, o apskaičiavimas buvo gautas.
3. Icarino nustatymas Epimedium ir jo ekstraktas HPLC
Chromatografijos sąlygos ir tinkamumo bandymas: ODS2 5u C18 (4 mm × 150 mm) kolonėlė; judama fazė: acetonitrilas-vanduo (30:70); aptikimo bangos ilgis: 270 nm; srautas: 0,8 ml / min. Teorinių plokštelių skaičius yra ne mažesnis kaip 1500, remiantis icariinu.
Etaloninio tirpalo paruošimas. Pamatinį vaistą icariin tiksliai pasverė, o 0,1 mg / ml tirpalas buvo paruoštas su metanoliu.
Tiriamojo tirpalo paruošimas: tiksliai pasverkite atitinkamą šio produkto miltelių kiekį (atitinkamai maždaug 1 mg icariino), sonikatuokite 30 minučių su metanoliu 25 ml, praskieskite iki 50 ml tūrio matavimo kolbą, naudokite 0,45 μm mikroporos filtrą. Membraninė filtracija yra tiriamasis tirpalas.
Bandymo metodas: 10 μl kiekvieno mėginio tirpalo ir etaloninio tirpalo buvo įpurškti į HPLC instrumentą, o plotas buvo apskaičiuotas pagal išorinį standartinį metodą.